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代次低,活力強(qiáng)!JM-1細(xì)胞,技術(shù)全程指導(dǎo)人B淋巴母細(xì)胞瘤細(xì)胞

發(fā)布時間:2026-06-17瀏覽:87次

代次低,活力強(qiáng)!JM-1細(xì)胞,技術(shù)全程指導(dǎo)B淋巴母細(xì)胞瘤細(xì)胞

產(chǎn)品名稱:JM-1細(xì)胞

中文名稱:B淋巴母細(xì)胞瘤細(xì)胞

組織來源:血

疾病淋巴瘤;B 細(xì)胞

傳代比例/細(xì)胞消化1:2傳代

培養(yǎng)基配置IMDM 培養(yǎng)基;20%胎牛血清(推薦胎牛血清PRO HN -FBS -500);0.05 mM β-mercaptoethanol;1%雙抗

背景:是一種前B淋巴母細(xì)胞,是從B細(xì)胞淋巴瘤患者的血液中分離出來的。可用于免疫學(xué)研究。

形態(tài)淋巴母細(xì)胞樣

生長特征懸浮生長

倍增時間每周 2-3次

培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

凍存條件凍存液:90%FBS,DMSO 10%,

或使用非程序凍存液:貨號H-W-50/100

保藏機(jī)構(gòu)ATCC; CRL-10423

備注該細(xì)胞為懸浮細(xì)胞,請注意離心收集細(xì)胞懸液,請勿直接倒掉細(xì)胞培養(yǎng)液。

懸浮細(xì)胞注意事項:

1. 懸浮細(xì)胞經(jīng)過快遞運輸,會出現(xiàn)細(xì)胞皺縮和死細(xì)胞碎片等情況,收到時先放培養(yǎng)箱靜置4小時以上,2.將瓶內(nèi)全部培養(yǎng)基吸至離心管內(nèi)離心收集,3.使用5-6ml新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞沉淀后接種T25培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。

懸浮細(xì)胞傳代:
如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。                                        方法一:將細(xì)胞懸液收集到離心管中1000rpm,離心5min,棄去上清,補加新鮮培養(yǎng)液后重懸混勻按1:2的比例分到 新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力。                                                                                 方法二:1) 半換液處理,豎著培養(yǎng)瓶靜置 1小時 左右,肉眼可見大部分細(xì)胞沉在底部;                                                                                                                              2) 輕輕吸掉 3ml 左右培養(yǎng)基,將剩余細(xì)胞懸起混勻;                                                   3) 將細(xì)胞懸液按 1:2 到 1:3 的比例分到新的含 6-8 mL 培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中或者培養(yǎng)瓶中,一般這樣傳代 3 次左右可以離心傳代一次。                                                                                            注意:使用試劑需要提前37度復(fù)溫,避免細(xì)胞遇冷受刺激皺縮。

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所有的懸浮細(xì)胞培養(yǎng)方法注意要點:

第一:維持細(xì)胞正常增值速度范圍,比如大多數(shù)懸浮細(xì)胞增值范圍是30-50萬個細(xì)胞/ml 的密度。

第二:提供優(yōu)秀的培養(yǎng)環(huán)境,包含所使用的培養(yǎng)基 血清,溫度,濕度等。

第三:有很多種懸浮細(xì)胞生長需要細(xì)胞之間有信號傳遞,因此需要相對聚集在一起則會生長的快,全部分散開了 可能就不長了,但是這個聚集在一起有一定的前提就是不能全部成團(tuán)了 出現(xiàn)細(xì)胞團(tuán)塊內(nèi)部 營養(yǎng)吸收和氣體交換不通暢也會凋亡。


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