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TeloHAEC細(xì)胞通過STR鑒定,提供支原體檢測報(bào)告,人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞
種屬:人
英文代號(hào):TeloHAEC
組織來源:心臟;主動(dòng)脈
疾病:端粒酶永生化細(xì)胞系
傳代比例:1:2傳代
wanquan培養(yǎng)基配置:基礎(chǔ)培養(yǎng)基500ml;生長添加劑5ml;胎牛血清25ml;雙抗5ml;0.3ug/mL嘌呤霉素
細(xì)胞背景:TeloHAEC是從一名正常23歲女性心臟中分離出的表現(xiàn)出內(nèi)皮形態(tài)的hTERT不朽細(xì)胞。該產(chǎn)品在藥物開發(fā)和心血管疾病研究中具有應(yīng)用價(jià)值,TeloHAEC (ATCC CRL-4052) 細(xì)胞保留了重要的內(nèi)皮細(xì)胞特征,如 CD31/PECAM-1 標(biāo)記表達(dá)和 LDL 功能性攝?。辉?TNFα 處理后,這些細(xì)胞顯示出有效的炎癥反應(yīng),并在 VEGF 刺激下增加增殖。當(dāng)與成纖維細(xì)胞共培養(yǎng)時(shí),TeloHAEC 細(xì)胞在體外也能形成對(duì) VEGF 刺激和 suramin 抑制有反應(yīng)的新生血管網(wǎng)絡(luò)。
形態(tài):內(nèi)皮細(xì)胞樣
生長特征:貼壁生長
STR:Amelogenin X CSF1PO 11,12 D5S818 12 D7S820 10,11 D13S317 9,12 D16S539 12,13 TH01 6,8 TPOX 8 vWA 15,16
倍增時(shí)間:每周 2至3次
換液頻率:2-3天換液一次
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
凍存條件:凍存液:90%FBS,DMSO 10%,
或使用非程序凍存液:貨號(hào)H-W-50/H-W-100
保藏機(jī)構(gòu):ATCC; CRL-4052
產(chǎn)品使用:僅限于科學(xué)研究,不可作為動(dòng)物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用。
貼壁細(xì)胞接收注意事項(xiàng): 貼壁細(xì)胞經(jīng)過快遞運(yùn)輸顛簸會(huì)出現(xiàn)漂浮脫落等情況: 收到先放培養(yǎng)箱靜置穩(wěn)定。如有脫落需收集處理,處理細(xì)節(jié)請(qǐng)查閱以下信息,原瓶內(nèi)為運(yùn)輸培養(yǎng)液,血清含量只有5%,需及時(shí)更換專用培養(yǎng)基。
貼壁細(xì)胞傳代步驟:
準(zhǔn)備工作:胰酶和培養(yǎng)基(需要提前37度復(fù)溫)、PBS(常溫)避免細(xì)胞遇冷受刺激
(1) 吸出原培養(yǎng)液
(2) 加入2ml左右PBS,輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶潤洗細(xì)胞,吸出PBS丟棄
(3) 加入1ml左右0.25%含EDTA的胰酶,輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使之浸潤所有細(xì)胞。
(4) 根據(jù)不同的細(xì)胞放入培養(yǎng)箱時(shí)及時(shí)關(guān)注消化時(shí)間,消化約2-3min,顯微鏡下看到細(xì)胞中間的細(xì)胞明顯分離變圓細(xì)胞間隙變大,顯微鏡下看細(xì)胞呈單個(gè)游離狀態(tài),側(cè)立培養(yǎng)瓶細(xì)胞可以滑落時(shí)可終止消化,可以輕拍培養(yǎng)瓶側(cè)身。(消化時(shí)主要看消化狀態(tài),如果沒有變圓,側(cè)立時(shí)不能滑落時(shí),可以適當(dāng)延長消化時(shí)間,每30s觀察一次細(xì)胞)
(5) 加入3ml含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,輕輕吹打細(xì)胞使之脫壁并在液體里反復(fù)輕輕吹打(不要太用力)使細(xì)胞盡量呈單顆細(xì)胞的懸浮液。
(6) 收集細(xì)胞懸液離心,1000rpm/min(約250g) 5分鐘,離心完吸出上清丟棄。
(7) 加入新鮮培養(yǎng)基,吹打幾下混勻細(xì)胞即可,按需接種到新培養(yǎng)瓶,補(bǔ)足培養(yǎng)基,擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進(jìn)行培養(yǎng)。
(8) 檢查培養(yǎng)箱二氧化碳,溫度和水盤。
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